本發(fā)明的權(quán)利要求1如下:
一種NK細(xì)胞凍存液,所述的NK細(xì)胞凍存液由Cryostor? CS10和人血清白蛋白組成;所述的Cryostor?CS10和人血清白蛋白的體積比為3∶1。
對(duì)比文件1(簡(jiǎn)稱D1)公開(kāi)了:
一種免疫細(xì)胞凍存液,其由CryoStor? CS10、人血白蛋白注射液和氯化鈉注射液組成。
對(duì)于如此小的差異,還能夠拿到授權(quán)嗎?秉承著“只要有區(qū)別就會(huì)有希望”的信念,開(kāi)啟我們的答復(fù)之旅。
首先,從技術(shù)效果入手:
從本發(fā)明表1中記載的數(shù)據(jù)可以看出:D0(凍存前)本發(fā)明實(shí)施例1凍存液的平均細(xì)胞活率為79.12%;D1(復(fù)蘇當(dāng)天)實(shí)施例1凍存液的平均細(xì)胞活率為77.71%。培養(yǎng)至D4時(shí),實(shí)施例1凍存液活率細(xì)胞活率恢復(fù)到70.40%,相比于復(fù)蘇當(dāng)天降幅僅為7.31%。
而對(duì)比文件1公開(kāi)的數(shù)據(jù)中顯示:
凍存液3為對(duì)比文件1中凍存效果最好的凍存液。D0(復(fù)蘇當(dāng)天)凍存液3的活細(xì)胞比例為97.1%。培養(yǎng)至D3時(shí),凍存液3的活細(xì)胞比例為85.3%,相比于復(fù)蘇當(dāng)天降幅為11.8%。
由以上結(jié)果可知,本發(fā)明提供的NK細(xì)胞凍存液在D4時(shí)具有更小的降幅,能夠更好的維持細(xì)胞活率,凍存效果更好。
現(xiàn)在已經(jīng)證明本發(fā)明相比于最接近的現(xiàn)有技術(shù)具有明確的區(qū)別特征,并且該區(qū)別特征能夠解決技術(shù)問(wèn)題。接下來(lái)就要證明技術(shù)方案的獲得并不是顯而易見(jiàn)的。
① 本發(fā)明對(duì)氯化鈉注射液進(jìn)行省略
D1表1公開(kāi)了不同配比的凍存液的成分配比:
并記載了上述凍存液的活細(xì)胞比例,結(jié)果如下:
凍存液1為CryoStor? CS10:人血白蛋白注射液=7:1;復(fù)蘇后4天時(shí),活細(xì)胞比例相較于復(fù)蘇當(dāng)天下降了21.3%。
凍存液3為CryoStor? CS10:稀釋液=1:1;所述稀釋液人血白蛋白注射液和氯化鈉注射液按1:3的體積比混合。凍存液3復(fù)蘇后4天時(shí)活細(xì)胞比例相較于復(fù)蘇當(dāng)天下降了11.8%。
相較于凍存液3,凍存液1缺少了氯化鈉注射液這一組分。而凍存液1的凍存效果顯著下降。可以推測(cè)出,氯化鈉注射液具有一定的凍存功效。
由此可見(jiàn),按照本領(lǐng)域技術(shù)人員的公知常識(shí),缺少氯化鈉注射液這一組分會(huì)使凍存液的效果變差。因此,本領(lǐng)域技術(shù)人員不能夠通過(guò)D1對(duì)氯化鈉注射液進(jìn)行省略。
② 現(xiàn)有技術(shù)中CryoStor? CS10和人血白蛋白注射液的組合凍存效果不佳
D1公開(kāi)了凍存液1(CryoStor? CS10:人血白蛋白注射液=7:1)復(fù)蘇后4天時(shí),活細(xì)胞比例相較于復(fù)蘇當(dāng)天下降了21.3%。由此可見(jiàn),D1公開(kāi)了:CryoStor? CS10和人血白蛋白注射液組合物的凍存效果不好。因此,本領(lǐng)域技術(shù)人員沒(méi)有動(dòng)機(jī),根據(jù)對(duì)比文件1中各成分濃度比例,調(diào)整CryoStor? CS10和人血清白蛋白的體積比,從而達(dá)到更好的凍存效果。
另外,D1的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與本發(fā)明的技術(shù)效果相反,可見(jiàn)CryoStor? CS10和人血清白蛋白在特定的比例下共同發(fā)揮作用取得了預(yù)料不到的技術(shù)效果,克服了技術(shù)偏見(jiàn)。以上結(jié)果是本領(lǐng)域技術(shù)人員在本申請(qǐng)公開(kāi)前所無(wú)法預(yù)期的,因此本申請(qǐng)具有預(yù)料不到的技術(shù)效果。
綜上所述,本發(fā)明權(quán)利要求1具備創(chuàng)造性,符合專利法第22條第3款的規(guī)定。最終,本發(fā)明拿到了授權(quán)。
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